到表层，其形态由圆形到多角型，细胞浆由浓稠变稀薄，细胞核由纤维状逐渐致密。孕激素在雌激素作用的基础上使中层细胞增多，但无雌激素不能发展为表层细胞。阴道细胞学检查可反映雌激素的分泌状态，从而反映卵巢的功能，预测排卵。
（一）标本采集与制作
窥阴器扩张阴道后，用棉棒或木制刮板于穹隆部或中段侧壁取少量分泌物涂于玻片上，立即浸于乙醚和95%酒精1：1固定液中5分钟，然后用shorr 或Papanicolaon法染色，再在显微镜下观察。
表层细胞大而扁平，多角形，胞浆嗜碱性，核圆而小，核质浓缩。
中层细胞呈圆形或棱形，比表层细胞小，胞浆碱性，有时有小空泡，核稍大，呈小泡状。
底层细胞小、圆形、核大，占整个细胞的1/3-1/2。
（二）常用指数
1.成熟指数（MI） 为三层阴道上皮细胞的百分比，表示为MI＝底层（A）：中层（B）：表层（C），一般计数400个细胞，计算其平均数。雌激素作用越强，比值右移。
2.致密核细胞指数（KI） 100个表层细胞中致密细胞的百分比，其值越高，雌激素作用越强。
3.嗜伊红细胞指数（EI） 100个表层细胞中嗜伊红细胞的百分率。
4.皱褶指数（FI） 主要为中层细胞，其边缘皱褶或扁平，常呈堆积状，主要反映孕激素水平。
5.堆集细胞指数（GI） 4个以上集合成群的细胞与分散细胞之比，其意义同FI。
（三）反映卵巢功能的阴道细胞学标准
1.对卵巢功能低落者，以底层细胞计数
轻度低落<20%
中度低落21%-40%
高度低落>40%
2.对卵巢功能影响者，以表层细胞计数
轻度影响<20%
中度影响21%-60%
高度影响>60%
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